产品资料

大鼠臂板蛋白7A(SEMA7A)ELISA试剂盒

如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称: 大鼠臂板蛋白7A(SEMA7A)ELISA试剂盒
产品型号: 96T/48T
产品展商: 国产and进口
产品文档: 无相关文档

简单介绍

我司为您专注科研产品,代理多个国外品牌CST、R&D、ebioscience、abcam、IBL,我司提供的ELISA试剂盒种属有:大鼠、小鼠、人、豚鼠、植物、牛、羊、猪、鸡、鸭等,产品规格分为96T、48T,货期短,质量优,专门快递发...


大鼠臂板蛋白7A(SEMA7A)ELISA试剂盒  的详细介绍
产品性状:盒装液体。
 
  我公司检测试剂盒提供免费检测服务,公司将根据实验工作量和难易程度,双方协定实验周期,保质保量完成委托实验,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费。
 
  运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
 
  待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
 
  ELISA试剂盒检测范围:
 
  人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、*****、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
 
  ELISA试剂盒检测类型:双抗体夹心法测抗原、双抗原夹心法测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体、ABS-ELISA法。
 
  检测试剂盒每次实验的标准曲线一般设5个不同浓度,加上空白孔,标准曲线一共需要6个孔。因此,一个48T试剂盒*多可以测定42个样本(不做重复且一次用完),一个96T试剂盒*多可以测定90个样本(不做重复且一次用完)。可以根据实际样本数量和实验计划选择合适的产品规格。
 
  操作注意事项:
 
  1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
 
  2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
 
  3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
 
  4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
 
  5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
 
  6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
 
  7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
 
  8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
 
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
 
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内**的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
 
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
 
ELISA试剂盒实验记录注意的问题
1. 定期整理、分析数据,并向导师汇报。
2. 保持实验记录的真实性和完整性;记录时间(年、月、日)。
3. 实验记录不允许隔天写以及写在纸片上。
4. 即便是阴性结果,也必须保留。不能仅记录符合主观想象的内容和自认为成功的实验。
5. ELISA试剂盒实验记录原始数据(包括照片)必须贴在当天的试验结果栏里;不要保留在公共计算机里。
ELISA试剂盒保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

  实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联**吸附试验(ELISA)。往预先包被抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
 
样本处理及要求
1.  血清将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。*后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4.  细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
 
需要而未提供的试剂和器材
  • 酶标仪(450nm)
  • 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
  • 37℃恒温箱
  • 蒸馏水或去离子水
 
试剂盒组成
 
名称 96孔配置 48孔配置 备注
微孔酶标板 8孔×12条 8孔×6条
标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管
样本稀释液 6mL 3mL
检测抗体-HRP 10mL 5mL
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL
底物B 6mL 3mL
终止液 6mL 3mL
封板膜 2张 2张
说明书 1份 1份
自封袋 1个 1个

1.  标准品浓度依次为:24、12、6、3、1.5、0.75 ng/mL
2.  经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过*大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
 
注意事项
  • 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
  • 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
  • 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
  • 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
  • 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
  • 在储存和温育时避免强光直接照射。
  • 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
  • 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
  • 不能使用过期产品。
  • 如果可能传播**,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
 
试剂准备
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
 
操作步骤
  1.   从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  2.   设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
  3.   样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
  4.   除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  5.   弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
  6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.   每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
 
实验结果计算
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

 
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